PurProX®Colonne préremplie AAVPure — Le fondement du développement de procédés
PurProX®Les colonnes préremplies (0.5mL/1mL/5mL) servent de lien critique entre la R&D et le passage à l'échelle.
Préremplies avec exactement le mêmeAAVPure Affinity Mediautilisé dans la fabrication en vrac, ces colonnes sont disponibles en versionsU1etU2versions. Leur conception "Plug-and-Play" permet aux chercheurs de contourner les procédures de remplissage fastidieuses, permettant une connexion directe aux systèmes FPLC (par exemple, ÄKTA) pour le criblage de paramètres spécifiques au sérotype et la production de vecteurs à petite échelle.
PurProX®Solution de purification AAV
COACommander PurProX®Colonnes préremplies
| Type de produit | N° de catalogue | Nom du produit | Taille | Prix (en USD) |
|---|---|---|---|---|
| Colonne pré-remplie | GMV-PurProX-AAVPure-U-1-P1ml | PurProX®AAVPure Colonne pré-remplie-1 | 1mL | |
| Colonne pré-remplie | GMV-PurProX-AAVPure-U-2-P1ml | PurProX®AAVPure Colonne pré-remplie-2 | 1mL | |
| Colonne pré-remplie | GMV-PurProX-AAVPure-U-1-P5ml | PurProX®AAVPure Colonne pré-remplie-1 | 5mL | |
| Colonne pré-remplie | GMV-PurProX-AAVPure-U-2-P5ml | PurProX®AAVPure Pre-packed Column-2 | 5mL |
Produits associés à PurProX®Colonnes pré-remplies
| Type de produit | N° de catalogue | Nom du produit | Taille | Prix (en USD) |
|---|---|---|---|---|
| Résine d'affinité AAV | GMV-PurProX-AAVPure-U-1-10ml | PurProX®AAVPure Affinity Resin-1 | 10mL | |
| Résine d'affinité AAV | GMV-PurProX-AAVPure-U-1-25ml | PurProX®AAVPure Affinity Resin-1 | 25mL | |
| AAV Affinity Resin | GMV-PurProX-AAVPure-U-1-50ml | PurProX®AAVPure Affinity Resin-1 | 50mL | |
| AAV Affinity Resin | GMV-PurProX-AAVPure-U-1-250ml | PurProX®AAVPure Affinity Resin-1 | 250mL | |
| AAV Affinity Resin | GMV-PurProX-AAVPure-U-1-1L | PurProX®AAVPure Affinity Resin-1 | 1L | |
| AAV Affinity Resin | GMV-PurProX-AAVPure-U-1-5L | PurProX®AAVPure Affinity Resin-1 | 5L | |
| AAV Affinity Resin | GMV-PurProX-AAVPure-U-2-10ml | PurProX®AAVPure Affinity Resin-2 | 10mL | |
| AAV Affinity Resin | GMV-PurProX-AAVPure-U-2-25ml | PurProX®AAVPure Affinity Resin-2 | 25mL | |
| AAV Affinity Resin | GMV-PurProX-AAVPure-U-2-50ml | PurProX®AAVPure Affinity Resin-2 | 50mL | |
| Résine d'affinité AAV | GMV-PurProX-AAVPure-U-2-250ml | PurProX®AAVPure Affinity Resin-2 | 250mL | |
| Résine d'affinité AAV | GMV-PurProX-AAVPure-U-2-1L | PurProX®AAVPure Affinity Resin-2 | 1L | |
| Résine d'affinité AAV | GMV-PurProX-AAVPure-U-2-5L | PurProX®AAVPure Affinity Resin-2 | 5L |
Spécifications techniques
| Numéro de catalogue | GMV-PurProX-AAVPure-U-1-P;GMV-PurProX-AAVPure-U-2-P |
| Nom du produit | PurProX®AAVPure Colonne pré-remplie |
| Matrice de support | Résine polymère |
| Ligand immobilisé | VHH |
| Affinité de sérotype | GMV-PurProX-AAVPure-U-1-P: Liaison testée - AAV2, AAV5, AAV6, AAV8, AAV7m8, AAV-DJ; GMV-PurProX-AAVPure-U-2-P: Liaison testée - AAV9 |
| Capacité de liaison | ~3E+14 vp par mL de résine |
| Solvant d'expédition | 2% d'alcool benzylique |
| Taille moyenne des particules | 50 µm |
| Débit recommandé | Temps de séjour ≥3 minutes |
| Résistance mécanique | 10bar (1Mpa) |
| Plage de pH (tous les ligands) | 2-10 |
| Température de fonctionnement | RT |
| Instruction de stockage | Ne pas congeler |
Données de validation de PurProX®Colonne pré-remplie AAVPure pour différents sérotypes d'AAV
Fig1. AAV8 purifié avec résine d'affinité AAV par AKTA
Chromatogramme illustrant le processus de purification du sérotype AAV8 à l'aide de la résine d'affinité AAV sur le système ÄKTA. L'axe des x représente le temps, tandis que l'axe des y montre l'absorbance (A280 pour les protéines, A260 pour les acides nucléiques) et la conductivité. Les pics indiquent les phases de chargement, de lavage et d'élution.
Fig2. Coloration à l'argent de la purification d'AAV8
Gel SDS-PAGE coloré à l'argent montrant les bandes protéiques des fractions de purification d'AAV8. Les pistes incluent les marqueurs de poids moléculaire, le lysat, le flux traversant (FT) et les fractions d'élution. Les protéines de la capside (VP1, VP2, VP3) sont visibles dans la piste d'élution à ~60-80 kDa.
Fig3. Coloration à l'argent de la purification d'AAV6
Gel SDS-PAGE coloré à l'argent représentant les bandes protéiques des fractions de purification d'AAV6. Les pistes montrent les marqueurs, le lysat, le flux traversant (FT) et l'élution, avec les protéines de la capside d'AAV6 (VP1, VP2, VP3) proéminentes dans la piste d'élution.
Tableau.1 Récupération de plusieurs sérotypes d'AAV purifiés
| Sérotype | Échantillon | Vg | Taux de récupération (%) |
|---|---|---|---|
| AAV2 | Charge | 5.72E+12 | / |
| Élution | 5.19E+12 | 90.73 | |
| AAV5 | Charge | 3.36E+13 | / |
| Élution | 3.13E+13 | 93.15 | |
| AAV6 | Charge | 8.28E+12 | / |
| Élution | 7.73E+12 | 93.36 | |
| AAV8 | Charge | 1.33E+13 | / |
| Élution | 1.24E+13 | 93.67 |
Foire aux questions (FAQ)
Q1 : Qu'est-ce que la colonne PurProX® AAVPure Pre-packed Column ?
R : La colonne PurProX® AAVPure Pre-packed Column est une colonne de chromatographie d'affinité prête à l'emploi, pré-remplie avec une résine de purification AAV haute performance (AAVPure-U-1 ou U-2), conçue pour la purification de vecteurs AAV à petite échelle ou pour le criblage de paramètres de procédé sans remplissage manuel.
Q2 : Quelles variantes sont disponibles, et quels sérotypes d'AAV ciblent-elles ?
R : Deux variantes sont disponibles :
-U-1 : Large spectre, efficace pour AAV2/5/6/8/DJ/7m8 ;
-U-2 : Optimisé spécifiquement pour AAV9 et ses variants (p. ex., série AAV-PHP).
Q4 : La composition chimique de la résine est-elle identique à celle de la résine d'affinité AAVPure en vrac ?
R : Oui. La colonne pré-remplie utilise exactement le même support d'affinité que la résine AAVPure en vrac, garantissant une homologie de procédé et permettant une mise à l'échelle linéaire de la R&D à la production.
Q8 : La colonne est-elle réutilisable ?
R : Une réutilisation limitée est possible avec des protocoles de régénération appropriés, mais l'usage unique est recommandé pour des résultats cohérents dans les applications à petite échelle. Contactez le support technique pour des directives de régénération.
Q9 : En quoi diffère-t-elle de la colonne de centrifugation AAVEasy ?
R : La colonne pré-remplie AAVPure nécessite un système FPLC pour un contrôle précis du débit et des tampons—idéal pour le développement de procédés—tandis que AAVEasy est un outil basé sur la centrifugation, sans équipement, pour une purification rapide de <30-minute. Les deux partagent une composition chimique de résine identique, mais répondent à des besoins de flux de travail différents.